Midori Green Advance核酸染料

Catalogue number: MG04（貨號：MG04）

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining（1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色劑，用于凝膠或后染色）

Benefits（優(yōu)點）:

• Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels（瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內(nèi)染色）
• No toxicity, non-carcinogenic（無毒，無致癌性）
• Safe alternative to ethidium bromide（溴化乙錠的安全替代品）
• High fluorescence（高熒光）

• Optimal for UV-light（優(yōu)化適合紫外線）

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下一代凝膠內(nèi)染色

MIDORIGreen Advance是第二代非致癌染料。 經(jīng)過紫外線或藍/綠光激發(fā)后，信號更優(yōu)化。 它保持了諸如非致癌性和優(yōu)異的信噪比等優(yōu)勢。 如圖所示。 1當使用Blue / Green LED技術(shù)時，MIDORIGreen Advance比溴乙錠更好。

圖1：使用藍/綠LED透射照明器比較MIDORIGreen Advance（左綠色）和溴化乙錠（右紅色）的靈敏度。

MIDORIGreen Advance即使對于較小的DNA片段也顯示出很高的靈敏度。 MIDORIGreen Advance的稀釋倍數(shù)可高達1：25000。 因此，對于100 ml瓊脂糖凝膠染色，4-6μl足夠，導致?17至25升染色的瓊脂糖凝膠。

經(jīng)驗證的安全性

良好地替代誘變的DNA染色劑溴化乙錠以傳遞強信號是*的。 MIDORIGreen Advance發(fā)出的信號強度相當。 但是，不得危及用戶的安全。 因此，使用MIDORIGreen Advance進行了幾次測試，根據(jù)這些測試，MIDORIGreen Advance是安全的。

染色Protocol：

凝膠內(nèi)染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液（濃度為0.8-3.0％）并加熱，直到溶液*澄清，看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain，輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC，然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時，加載樣品并進行電泳。
使用UV或LED照明器檢測波段。黃色或綠色的明膠或玻璃紙濾鏡應(yīng)用于攝影。

后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應(yīng)優(yōu)選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠，每100 ml緩沖液應(yīng)使用10-25 µl的污漬。
合適的染色時間（5 – 60分鐘）和污漬的數(shù)量可能取決于凝膠的厚度。

注意：不建議將SDS包含在加載緩沖液中使用，因為由污點和SDS相互作用引起的條帶外觀！

客戶常見問題解答（FAQ）

問：我可以將Midori Green Advance與脈沖場凝膠電泳（PFGE）一起使用嗎？通常，我使用EtBr進行后期處理。

答：您可以在“Protocol”部分中找到進行后染色的方案。

問：您是否有處置Midori Green Advance的詳細信息？我了解該分子對光敏感，我想知道MGA凝膠在使用后是否可以在處置前暴露于光下？

答：MGA無毒，足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發(fā)射率會被光破壞，但這并不意味著化學結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化。但是沒有必要破壞分子，因為它仍然無害。與溴化乙錠相比，這是*的優(yōu)勢–無需特殊處理。

問：為什么不能以相同方式使用MGA和MGD？

答：化學結(jié)構(gòu)*不同。我們測試過將MGD用作MGA，反之亦然。我們不能同時推薦這兩種應(yīng)用。當您嘗試將MGD用作MGA時，您需要大量MGD和階梯才能獲得可觀察的波段。通過這種方式可以檢測不到低濃度的樣品。 MGD設(shè)計用于添加樣品，并且濃縮程度遠低于MGA。以MGA之類的方式使用MGD是非常不經(jīng)濟的–您需要在凝膠中添加10倍以上的量才能觀察條帶。當您嘗試將MGA用作MGD時，也會出現(xiàn)問題，因為MGA的濃度過高，并且運行方向相反。我試圖降低MGA濃度，在這種情況下，您會看到一些條帶，但它們與所使用的稀釋液無關(guān)，非常弱。總結(jié)一下，您可以說兩種染料都是針對不同的應(yīng)用（在凝膠中和添加到樣品中）設(shè)計的（具有不同的結(jié)構(gòu)式）和優(yōu)化的，因此不建議嘗試以其他方式使用它們。

問：MGA和MGD有什么區(qū)別？這些污漬的穩(wěn)定性如何？

答：主要區(qū)別在于Midori Green Advance（MGA）用于凝膠和后染色（意味著它像溴化乙錠一樣使用），而Midori Green Direct（MGD）直接添加到樣品中。根據(jù)凝膠文檔系統(tǒng)的不同，我們建議您使用一種或另一種，但您可以在每種照明器（UV 302、365 nm，藍色照明器和藍色/綠色透射照明器）中同時使用這兩種照明器–只有性能可以提高到合適水平。例如，如果用戶使用UV透照器，我們建議使用MGA，因為使用該色斑的效果非常好。我們的藍/綠色LED儀器和MGD可帶來非常出色的性能-*沒有背景，而且信號強度很高。兩種污漬在室溫下均穩(wěn)定，因此在室溫下運輸沒有問題，但我們建議將污漬保存在4°C下。

問：MGA和MGD是否可以與瓊脂糖和丙烯酰胺凝膠一起使用？

答：我們的客戶給我們反饋說MDG和MGA（染色后）可用于丙烯酰胺凝膠，但主要是為瓊脂糖凝膠設(shè)計的。

問：如果我將MGA在-20°C下保存6天會怎樣？可以使用嗎？

答：凍結(jié)會破壞MGA的功能。您仍然可以嘗試，但我們的經(jīng)驗使冷凍后的照明失效。

問：我在瓊脂糖凝膠中使用Midori Green Advance，為什么在凝膠電泳35分鐘后看不見小條帶，您有什么建議？

答：Midori Green Advance可能帶有電荷，并且與DNA的方向不同，因此凝膠從底部脫色。要查看小樂隊，您可以將運行時間減少到25分鐘。如果您想讓凝膠運行更長的時間，那么您可以*跡。可以使用in凝膠染色，然后縮短后染色時間，或者只對凝膠進行后染色，而無需先進行in凝膠染色。在這兩種情況下，整個凝膠都會被染色，并且觀察到非常低的分子量帶。您也可以使用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。該染料會添加到DNA中，因此無論電泳多長時間，每個條帶都會被染色。另一個優(yōu)點是不存在背景。特別是如果您使用藍色或藍色/綠色LED燈代替紫外線，則會收到令人驚奇的信號。

問：在Midori Green Advance數(shù)據(jù)表上，描述了后期處理多可以使用2-3次。您可以在不損失太多敏感性的情況下使用發(fā)布后解決方案多長時間？

答：實際上，我們的客戶使用頻率超過2-3次。如果染色浴始終變暗，您可以在任何情況下使用2-3次而不會降低信號強度。但也可以使用5 – 8次而不會降低信號，具體取決于凝膠的大小和樣品量。如果您檢測到強度降低，則可以增加一點MGA，從而獲得與以前相同的信號強度。

問：到期后可以使用MGA嗎？

答：是的，您可以使用它。到期日期只是我們保證的短時間，但通常會持續(xù)更長的時間。